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荧光报告基团

荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度.原理: PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团.探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时,探针结合在DNA任一一条单链上;PCR扩增时,Taq酶的5'端-3'端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步.

fam检测光谱比较宽,会干扰到hex,如果你确定仪器的颜色补偿功能比较好用的话可以选这两个.如果对于你们钱不是问题的话,尽量选择光谱间隔较远的,如fam和cy5.

RNA探针.TaqMan 荧光探针种寡核苷酸探针,荧光基团连接探针5'末端,淬灭剂则3'末端.PCR扩增加入引物同加入特异性荧光探针,探针完整,报告基团发射荧光信号淬灭基团吸收;PCR扩增,Taq酶5'-3'外切酶性探针酶切降解,使报告荧光基团淬灭荧光基团离,荧光监测系统接收荧光信号,即每扩增条DNA链,荧光形,实现荧光信号累积与PCR产物形完全同步.用荧光基团FAM,TET,VIC,HEX. 新型TaqMan-MGB探针使该技术既进行基定量析,析基突变(SNP),望基诊断体化用药析首选技术平台.感觉这样的提问是没有意义的还是自己找下资料吧

想想萤火虫吧,它为什么能发光?它身上不可能有灯泡吧.那就是荧光蛋白.很多蛋白在紫外光激发下都能产生荧光的,这是物理中吸收能量,释放能量的过程.至于荧光PCR检测.如楼上几位所说的,就是用荧光基团嵌合到DNA中,根据荧光的亮度判断DNA的量,从而达到一种定量的检测.

内参就是一个表达量在各个组基本保持不变的基因,又叫看家基因,比如常用的gapdh, actin.或者18s rrna也可以. 如果内参表达量一致,说明你pcr的上样量一致,样本的质量也一致.如果出入很大,说明你的样本的浓度或者是质量有问题.测到的目的基因的表达量就不可靠了

MGB 的意思是小沟结合,全称是 Minor Groove Binder.Taqman就是一个商标,不是缩写,就是全称,这两个都是用来描述荧光定量PCR中使用的探针.Taqman探针两端分别带有荧光基团和荧光淬灭基团,在正常状态下,探针上的荧光被淬

荧光标记是将荧光基团复共价连接到蛋白、核酸等分子上制的过程.通常使用能够选择性地与目百标分子上存在的功能基团反应的荧光素度基团衍生物来完成这样的过程.最常见知的标记过的分子是抗体,经常使用标记过的抗体来检道测特定的目标分子.

荧光定量PCR所使用的荧光化学可分为两种:荧光探针和荧光染料.原理: PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团.探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'端-3'端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步.

探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步

常见类型有:6-羧基荧光素、四氯-6-羧基荧光素、2,7-二甲基-4,5-二氯-6-羧基荧光素、六氯-6-甲基荧光素、CY3、6-羧基四甲基若丹明、ROX、LCRED640等.原理:当荧光物质浓度过大,荧光物质的分子和熄灭剂分子碰撞而损失能量,二者

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